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[關(guān)鍵詞] 貝母素甲；K562細胞；氧化-還原；細胞增殖
[中圖分類號] R733.7；R285.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）06（c）-0016-04
[Abstract] Objective To investigate the effect of peimine on cell proliferation of human leukemia K562 cells and the function of redox imbalance in this progress. Methods The human leukemia K562 cells were cultured in vitro. After K562 cells were treated with peimine at concentrations of 50， 100， 200， 400 and 800 μmol/L for 24 h， the cell proliferation was measured by thiazolyl blue tetrazolium bromide （MTT） assay. And the half maximal inhibitory concentration （IC50） of peimine was calculated using the Bliss method. The changes of intracellular reactive oxygen species （ROS） and glutathione （GSH） concentration were detected using spectrophotometry. Results Peimine inhibited the proliferation of K562 cells in a dose-dependent manner. And the IC50 of peimine was 238 μmol/L. Furthermore， peimine could promote the ROS production and glutathione （GSH） depletion. The balance of oxidation-antioxidation function destroyed. Pre-incubation with antioxidants GSH or N acetyl cysteine （NAC） almost abolished the effects of peimine. Conclusion The present study therefore shows that peimine inhibits the proliferation activity in K562 cells. The redox imbalance may play a key role in this process.
[Key words] Peimine； K562 cells； Redox； Cell proliferation
浙母為臨床常用止咳化痰中藥，始載于《本草正》，為貝母屬植物浙貝母（Fritillatia thunbergii Miq.）的干燥鱗莖[1]。貝母素甲（Peimine）是浙貝母的主要藥效成分之一[2]，對多種腫瘤細胞的生長有抑制作用，能逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的多耐藥現(xiàn)象[2-7]。以浙貝母為君藥的復(fù)方淅貝母顆粒能提高難治性急性白血病圍化療期臨床緩解率[8]。盡管這些研究提示貝母素甲具有抗腫瘤活性，但其對慢性粒細胞白血病（chronic myeloid leu？鄄kemia，CML）細胞增殖影響的研究依然甚少，諸多相關(guān)問題有待厘清。
細胞在生命活動過程中會產(chǎn)生活性氧（reactive oxygen species，ROS）。同時，細胞中還存在谷胱甘肽（glutathione，GSH）、過氧化氫酶（catalase，GAT）等構(gòu)成的抗氧化系統(tǒng)，可清除過多的ROS，避免細胞受到過度的氧化損傷[9]。ROS的生成與清除之間的動態(tài)平衡使細胞處于一個正常的氧化-還原狀態(tài)，維持細胞生長、增殖等正常生命過程[10-12]。此狀態(tài)的失衡會導(dǎo)致細胞活力下降，甚至死亡。Bcr-Abl突變的CML細胞ROS水平比正常細胞高，對氧化-還原狀態(tài)的改變更為敏感[13]。一些藥物可通過誘導(dǎo)腫瘤細胞ROS爆發(fā)、GSH含量下調(diào)，抑制腫瘤細胞增殖、誘導(dǎo)細胞凋亡，從而起到抗腫瘤的效果[14-16]。
對此，本項研究采用人白血病細胞株K562為體外研究模型，試圖從細胞氧化-還原狀態(tài)變化的角度分析貝母素甲對人白血病細胞體外增殖的影響機制，為貝母素甲用于人白血病治療提供實驗依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 實驗材料
人慢性粒細胞白血病細胞株K562由福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)實驗室保存。
1.2 實驗藥物
貝母素甲（Peimine，純度> 98%）產(chǎn)自美國阿拉丁工業(yè)公司。稱取21.6 mg貝母素甲，采用0.2 mL無水乙醇助溶，再加19.8 mL RPMI 1640 培養(yǎng)基，配制成50 mmol/L工作液，過濾除菌，保存于-20℃?zhèn)溆谩?/p>
1.3 主要試劑及設(shè)備
培養(yǎng)基RPMI 1640與胎牛血清（fetal calf serum，F(xiàn)BS）為Gibco公司生產(chǎn)；MTT[3-（4，5-Dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide]和二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）產(chǎn)自Amresco公司；還原型谷胱苷肽（glutathione，GSH）、N-乙酰-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cystein，NAC）、GSH檢測試劑盒（S0053）和活性氧檢測試劑盒（S0033）購自碧云天生物技術(shù)研究所。CO2培養(yǎng)箱為德國Heraeus公司產(chǎn)品，超凈工作臺產(chǎn)于蘇州凈化設(shè)備有限公司，倒置相差顯微鏡購自日本Olympus公司，ELX800全自動酶標儀產(chǎn)自BioTek公司，Infinite 200 PRO全波長多功能微孔板檢測儀產(chǎn)自瑞士TECAN公司。
1.4 實驗方法
1.4.1 細胞培養(yǎng) K562細胞培養(yǎng)于RPMI 1640培養(yǎng)基（含10%FBS），培養(yǎng)環(huán)境為37℃、飽和濕度、5%CO2，3d傳代1次，收取對數(shù)生長期細胞用于實驗。
1.4.2 細胞增殖的檢測 將對數(shù)生長期的K562細胞（4×104個/mL）同步化后接種于96孔板內(nèi)，每孔加細胞懸液100 μL。各藥物組加入貝母素甲至終濃度分別為50、100、200、400、800 μmol/L，空白對照組加等體積的藥物溶解介質(zhì)。清除劑實驗中，用GSH（5 mmol/L）或NAC（5 mmol/L）分別預(yù)處理K562細胞1 h，然后進行相應(yīng)的藥物處理。加藥處理24 h后，每孔加MTT至0.5 mg/mL，常規(guī)培養(yǎng)3 h，離心棄上清，加100 μL DMSO溶解沉淀。采用570 nm為主波長，630 nm為參比波長，測定各孔光吸收值（A值）。細胞增殖抑制率=（1-實驗組A值/對照組A值）×100%，藥物對細胞的半數(shù)抑制濃度（IC50）采用Bliss法。實驗重復(fù)3次。
1.4.3 細胞ROS含量的檢測 參照文獻[17]所述方法進行測量。大致如下：同步化適量的K562細胞并隨機分組。以不同終濃度貝母素甲處理的為藥物組，以加等體積藥物溶解介質(zhì)處理的為空白對照組。抑制劑實驗中，采用ROS清除劑NAC預(yù)處理細胞1 h，然后進行相應(yīng)的藥物處理。常規(guī)培養(yǎng)細胞9 h后，各組細胞加ROS特異性熒光探針DCFH2-CA至10 μmol/L，37℃避光培養(yǎng)30 min，收集并用無血清細胞培養(yǎng)液洗滌細胞。采用激發(fā)波長488 nm，發(fā)射波長525 nm，于全波長多功能微孔板檢測儀檢測。以相對于空白對照組的倍數(shù)表示各組的ROS含量。實驗重復(fù)3次。
1.4.4 細胞GSH含量的檢測 按“1.4.3”所述方法分組并處理細胞，常規(guī)培養(yǎng)24 h后收集細胞，PBS洗滌1次，加入適量蛋白去除試劑溶液，振蕩混勻，反復(fù)凍融破碎細胞，離心取上清液進行測定。具體方法參照試劑盒說明書進行，405 nm處檢測光吸收值，計算GSH含量。
1.5 統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 貝母素甲對K562細胞增殖的抑制
利用MTT法檢測細胞活力是分析細胞增殖的一種快捷、常用的方法。本研究結(jié)果表明，各藥物組與空白對照組相比，100、200、400、800 μmol/L濃度組的吸光值顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），抑制率隨藥物濃度增大而升高。貝母素甲對K562的IC50為238 μmol/L。上述結(jié)果提示貝母素甲對K562細胞增殖存在抑制作用。見表1。
2.2 貝母素甲對K562細胞ROS生成的誘導(dǎo)
應(yīng)用DCFH2-DA熒光探針檢測貝母素甲對K562細胞ROS含量的影響。實驗結(jié)果顯示，貝母素甲100、200、400 μmol/L處理組的ROS含量分別為空白對照組的（1.41±0.17）倍、（1.81±0.18）倍和（2.19±0.18）倍。統(tǒng)計學(xué)分析表明，貝母素甲可誘導(dǎo)細胞ROS含量上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），呈現(xiàn)出劑量依賴性。采用ROS清除劑NAC預(yù)處理細胞1 h，然后再添加貝母素甲（400 μmol/L）處理，K562細胞ROS含量與對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），而與貝母素甲（400 μmol/L）處理組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），提示貝母素甲誘導(dǎo)細胞ROS的增加受到NAC抑制。提示貝母素甲可以誘導(dǎo)K562細胞ROS的生成。見圖1。
2.3 貝母素甲可引起K562細胞GSH含量的下降
研究結(jié)果表明，貝母素甲可以引起K562細胞內(nèi)GSH含量的顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。100、200、400 μmol/L貝母素甲處理可分別使GSH含量下降至空白對照組GSH含量的（72.01±9.15）%、（64.60±5.29）%和（50.89±3.34）%，具有量效P系。這提示貝母素甲可能抑制K562細胞內(nèi)GSH生成或促進其消耗，下調(diào)細胞內(nèi)GSH含量。見圖2。
2.4 氧化-還原狀態(tài)的失衡參與貝母素甲對K562細胞增殖的抑制
結(jié)果顯示，NAC或GSH能有效逆轉(zhuǎn)貝母素甲對K562細胞增殖的抑制。利用NAC清除過多的ROS或是直接補充GSH，可避免細胞內(nèi)氧化-還原狀態(tài)的失衡。這提示氧化-還原狀態(tài)的失衡在貝母素甲對K562細胞增殖的抑制過程中起重要作用。見表2。
3 討論
浙貝母是臨床上常用的化痰藥物，具有清熱化痰，開郁散結(jié)之功效。其中主要活性成分之一貝母素甲的抗腫瘤作用頗受關(guān)注[18]。胡凱文等[7]率先報道貝母素甲對人白血病細胞K562具有體外抑制細胞增殖的作用。本研究亦證實貝母素甲可抑制K562細胞增殖與上述文獻報道相符。
細胞內(nèi)正常的氧化-還原狀態(tài)是其生命活動所必需的。細胞內(nèi)ROS大量產(chǎn)生或抗氧化防護系統(tǒng)（如GSH）功能的下降，可導(dǎo)致氧化-還原狀態(tài)的失常，造成細胞氧化損傷乃至死亡。一些抗腫瘤藥物通過誘導(dǎo)K562細胞大量產(chǎn)生ROS，下調(diào)GSH含量，改變細胞的氧化-還原狀態(tài)，從而抑制K562細胞增殖，殺傷細胞[10，14，19]。GSH是細胞內(nèi)的一種重要抗氧化肽。有證據(jù)表明，細胞內(nèi)GSH含量變化與某些藥物對腫瘤細胞增殖的抑制作用相關(guān)。鄭智等[20]報道復(fù)方浙貝母顆粒協(xié)同阿霉素可降低人白血病細胞移植瘤組織細胞中GSH含量，抑制抗氧化酶的表達，提高難治耐藥性白血病臨床緩解率。本研究結(jié)果表明，貝母素甲處理可改變K562細胞的氧化-還原狀態(tài)，具體表現(xiàn)為貝母素甲處理引起K562細胞ROS水平上調(diào)，細胞內(nèi)GSH含量下降。這導(dǎo)致細胞內(nèi)氧化-還原狀態(tài)的失衡。在上述工作基礎(chǔ)上，本研究進一步采用ROS清除劑NAC（5 mmol/L）或GHS（5 mmol/L）預(yù)處理K562細胞1 h，再給予貝母素甲（400 μmol/L）干預(yù)24 h，隨后進行MTT檢測，分析氧化-還原狀態(tài)失衡與貝母素甲對K562細胞增殖抑制的相關(guān)性。ROS清除劑NAC的預(yù)處理和GSH的補充幾乎完全消除了貝母素甲對K562細胞增殖的抑制。這些結(jié)果說明貝母素甲引發(fā)細胞內(nèi)氧化-還原失衡可能是其抑制K562細胞增殖，具有體外細胞毒作用的重要機制。
綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)貝母素甲能抑制K562細胞增殖。在這一過程中，貝母素甲調(diào)節(jié)了K562細胞內(nèi)ROS和GSH含量，破壞其氧化-還原平衡。活性氧清除劑NAC和GSH的處理能抑制貝母素甲的上述效應(yīng)，提示氧化-還原狀態(tài)影響貝母素甲對人白血病細胞K562增殖的抑制作用。
[參考文獻]
[1] 卓詩勤，張浩，丁弋娜，等.硫熏和鮮切浙貝母的化學(xué)成分及其藥理作用的比較研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2016， 34（3）：618-621.
[2] 黃長煌.蒸發(fā)光散射測定浙貝母中貝母素甲、貝母素乙的含量探究[J].中國衛(wèi)生標準管理，2016，7（18）：139-141.
[3] 諶海燕，陳信義.貝母素甲抑制人乳腺癌細胞-增殖及其對細胞凋亡的影響[J].中醫(yī)藥學(xué)報，2012，40（4）：12-15.
[4] 王冰，宋銳，牟宗玲，等.中藥逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的相關(guān)研究[J].中醫(yī)學(xué)報，2016，31（7）：946-948.
[5] 劉韋]，鄒富勝，李東華.浙貝母抑制耐藥腫瘤P糖蛋白的活性組分研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2015，22（4）：379-382.
[6] 唐曉勇，唐迎雪.浙貝母堿對肺癌細胞多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用觀察及機制探討[J].山東醫(yī)藥，2012，52（18）：4-6.
[7] 胡凱文，鄭洪霞，齊靜，等.浙貝母堿逆轉(zhuǎn)白血病細胞多藥耐藥的研究[J].中華血液學(xué)雜志，1999，20（12）：33-34.
[8] 李冬云，陳信義，姜靖雯.復(fù)方浙貝顆粒研究現(xiàn)狀與應(yīng)用前景分析[J].中國藥物與臨床，2009，9（2）：85-87.
[9] 陳俊宇，李俊瑋，梁源，等.活性氧：腫瘤進展的雙刃劍[J].中國實驗診斷學(xué)，2016，20（9）：1598-1600.
[10] Song W，Hu P，Shan Y，et al. Cartilage polysaccharide induces apoptosis in K562 cells through a reac，ve oxygen species-mediated caspase pathway [J]. Food Funct，2014， 5（10）：2486-2493.
[11] 段坦然，孟春春，唐兆新，等.活性氧在腫瘤發(fā)展和治療中的作用[J].中國細胞生物學(xué)學(xué)報，2016，38（10）：1295-1301.
[12] 楊夢祺，劉盼盼，黃蓬.腫瘤氧化還原代謝與干預(yù)[J].中國生化藥物雜志，2016，36（9）：16-23.
[13] Landry WD，Woolley JF，Cotter TG. Imatinib and Nilotinib inhibit Bcr-Abl-induced ROS through targeted degradation of the NADPH oxidase subunit p22phox [J]. Leuk Res，2013，37（2）：183-189.
[14] Khoshtabiat L，Mahdavi M，Dehghan G，et al. Oxidative stress-induced apoptosis in chronic myelogenous leukemia K562 cells by an active compound from the dithio-carbamate family [J]. Asian Pacific J Cancer Prev，2016，17（9）：4267-4273.
[15] 王海娟，張美芝，劉小菊，等.雷公藤內(nèi)酯醇逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥研究進展[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2016，22（10）：229-234.
[16] Ak？sakaya H，Tok S，Dal F，et al. β-carotene treatment alters the cellular death process in oxidative stress-induced K562 cells [J].Cell Biol Int，2017，41（3）：309-319.
[17] Yao JY，Wei X，Lu YH.Chaetominine reduces MRP1-mediated drug resistance via inhibiting PI3KAktNrf2 signaling pathway in K562Adr human leukemia cells [J]. Biochem Bioph Res Co，2016，473（4）：867-873.
[18] Xiao R，Cui WX，Yang L，et al. Extraction of total alkaloids，peimine and peiminine from the flower of Fritillaria thunbergii Miq using supercritical carbon dioxide [J]. J CO2 Utiliz，2017，18（2）：283-293.
（宿遷學(xué)院五系，江蘇宿遷223800）
摘要：職業(yè)生涯規(guī)劃是宿遷學(xué)院新生入學(xué)教育的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，科學(xué)地進行學(xué)生職業(yè)規(guī)劃測評是學(xué)生職業(yè)生涯規(guī)劃工作的重要組成部分。本文是依據(jù)朗途職業(yè)規(guī)劃測評系統(tǒng)，組織宿遷學(xué)院五系新生在接受系統(tǒng)教育與提示之后進行測量，并以學(xué)院職業(yè)生涯規(guī)劃的基本精神為指導(dǎo)進行的一次報告分析。一方面，這些分析會為系部學(xué)生的職業(yè)生涯規(guī)劃指導(dǎo)提供直接的數(shù)據(jù)參考；另一方面，這也為學(xué)生個體的職業(yè)生涯規(guī)劃提供了重要的指南。
關(guān)鍵詞 ：新生；職業(yè)生涯規(guī)劃；測評；分析報告
中圖分類號：G645文獻標識碼：A文章編號：1671—1580（2014）06—0031—02
收稿日期：2014—01—10
作者簡介：高雷（1986— ），男，江蘇宿遷人。宿遷學(xué)院五系專職政治輔導(dǎo)員，助教，碩士，研究方向：思想政治教育。
本分析報告依據(jù)的理論預(yù)設(shè)、分析的維度以及數(shù)據(jù)源都取自于朗途職業(yè)規(guī)劃測試系統(tǒng)。朗途職業(yè)規(guī)劃測試系統(tǒng)可以對學(xué)生個體穩(wěn)定的性格特質(zhì)以及創(chuàng)業(yè)的深層次動力進行測試，并針對學(xué)生的不同測試情況提供專業(yè)的職業(yè)規(guī)劃指導(dǎo)。從測試的指標項目來看，該系統(tǒng)設(shè)計了崗位與學(xué)生特長、與學(xué)生的動力驅(qū)動類型之間的匹配參考。通過綜合的測量結(jié)果，可以讓學(xué)生個體發(fā)現(xiàn)自身職業(yè)獲取的短板以及具體的改進方略。
學(xué)生個體在獲取自身職業(yè)生涯發(fā)展規(guī)劃的參照系之后，也懂得了“取人之長，補己之短”的現(xiàn)實途徑。同時，我們應(yīng)該提醒每位參與測試的學(xué)生：無論是自身穩(wěn)定的性格特質(zhì)，還是個體的動力類型，都是具有“先賦”意味的。它的穩(wěn)定與獨特只是相對的。隨著生命成長歷程的延續(xù)與生活情境的變遷，個體的知識庫和經(jīng)驗都會得到不斷的豐富，并影響學(xué)生的個體性格特質(zhì)與職業(yè)選擇的動力類型。這些都是職業(yè)生涯規(guī)劃指導(dǎo)教師應(yīng)該注意的問題。
結(jié)合宿遷學(xué)院五系新生在朗途職業(yè)規(guī)劃測評過程中所呈現(xiàn)出的統(tǒng)計規(guī)律，我們嘗試著分析本屆新生在職業(yè)規(guī)劃過程中的狀況，并期望分析過程能夠為我們之后的具體職業(yè)生涯規(guī)劃指導(dǎo)提供重要的參考。
一、參評學(xué)生基本狀況分析
五系新生的性別分布比例為女生占71%，男生占29%，女生的數(shù)量幾乎是男生的3倍。由于受中國傳統(tǒng)文化、生活成長環(huán)境、社會角色期望以及個體層次心理因素的影響，性別因素在職業(yè)規(guī)劃中的影響也比較明顯。五系新生年齡分布范圍是19~20歲的區(qū)間范圍，這與全院新生的年齡段分布是一致的。
二、與個體職業(yè)規(guī)劃測評相關(guān)的指標維度分析
（一）性格特質(zhì)類型維度
從數(shù)據(jù)顯示來看，學(xué)生在職業(yè)規(guī)劃受性格類型影響的元素中，“內(nèi)向感覺 情感 判斷”與“外向直覺 情感 判斷”的兩端分布較為均衡。一方面，證實了新生對本次測評的參與程度比較高，而且在填報測評報告時價值比較中立；另一方面，也告訴我們每一位指導(dǎo)教師要在這兩種類型性格匹配的職業(yè)種類中做好指導(dǎo)，并兼顧到其他性格類型的職業(yè)匹配，幫助學(xué)生發(fā)掘資源，整合有益信息，針對學(xué)生個體性格與職業(yè)的匹配銜接，做好進一步的指導(dǎo)工作。同時，通過分析得知，男生與女生在性格特質(zhì)普遍分布情況上有著較大的區(qū)別。這也就告訴我們，除了在性格特質(zhì)整體分布上要綜合關(guān)注與學(xué)生相匹配的職業(yè)規(guī)劃路徑，同時，也不能忽略性別因素對性格特質(zhì)的影響。當(dāng)然，這一過程也蘊含著中國傳統(tǒng)文化、生活成長環(huán)境、社會角色期望以及個體層次心理因素對性格特質(zhì)的影響。
（二）職業(yè)規(guī)劃的深層次動力源維度
1.成功愿望指數(shù)
統(tǒng)計分析結(jié)果顯示，五系新生有職業(yè)獲取成功強烈愿望的，只占學(xué)生總數(shù)的1/5，如果將這部分學(xué)生的過往經(jīng)歷與學(xué)生的成功愿望指數(shù)相關(guān)聯(lián)，學(xué)生在職業(yè)規(guī)劃過程中是否具有積極主動、努力進取的相關(guān)因素就可以從其過往的生命成長歷程中窺探一二，這也為我們進行有針對性的指導(dǎo)與分類教育提供了可能。當(dāng)然，在這一過程中還涵蓋著學(xué)生職業(yè)目標設(shè)定、新情境的駕馭以及自身位置的定位等指標體系，而這些也為指導(dǎo)教師對學(xué)生進行有針對性的、個別化的教育與指導(dǎo)提供了維度參照。
2.挫折承受指數(shù)
挫折承受指數(shù)是指針對受測者在面對挫折、失敗與困境時的心態(tài)、情緒與行動的可能性的測量。調(diào)查顯示，宿遷學(xué)院五系新生中有近半數(shù)的學(xué)生在面對失敗與困境時表現(xiàn)出的承受能力較低。這也就提示我們要在學(xué)生的抗壓能力方面進行有益的引導(dǎo)與幫助。在這一過程中，可以引入移情體驗與想象獲取的技巧，更為關(guān)鍵的是能夠?qū)⑦@方面的引導(dǎo)與教育融入到具體的情境與案例中。
3.人際交往指數(shù)
人際交往涉及互動過程中的“鏡中我”的內(nèi)心認知與對互動本身的意義的界定與意識問題。從調(diào)查中我們可以發(fā)現(xiàn)，五系新生中有超過1/3的學(xué)生存在人際交往方面的困境，表現(xiàn)出與人交往的動力不足、與人交往的技巧不夠、與人交往的程度不清等狀況。人際交往是個很傳統(tǒng)的社會心理問題。職業(yè)規(guī)劃專項測試中所顯示的學(xué)生人際交往系數(shù)分值只能作為一種參照。但交往也是有基本準則與要求的，如從容的心態(tài)、道德的規(guī)范、民族的風(fēng)俗與地域的特點等，這就需要我們準確地把握與有針對性地對待學(xué)生的人際交往問題。
4.影響愿望指數(shù)
影響愿望指數(shù)反饋的是一種人際交往過程中的狀態(tài)，即要求或希望別人按照自身想法行事的愿望程度。這類動力指數(shù)在五系新生群體中體現(xiàn)得較為明顯。這在一定程度上印證了“95后”學(xué)生的群體特質(zhì)，也給了每位教師一個提示，即要適當(dāng)?shù)匾龑?dǎo)他們學(xué)會積極地與人交流互動，懂得“謙讓”、“團隊”與“包容”?！爸t讓”會讓自身變得懂禮節(jié)、明事理；“團隊”能匯聚眾智，成就事業(yè)；“包容”能體現(xiàn)涵養(yǎng)，彰顯氣度。而這些都是我們職業(yè)、事業(yè)成功的重要保障。
以上四個方面的動力類型源構(gòu)成了影響學(xué)生個體職業(yè)規(guī)劃的重要的內(nèi)在影響因素。它的具體體現(xiàn)是動力類型歸類，如向著職業(yè)目標努力過程中所體現(xiàn)出的主宰型、寄托型、滿足型與自強型；在面對挫折、困境時所體現(xiàn)的承受類型（這是逆向的動力），有開拓型、堅守型、安定型與嘗試型。
這些性格類型與動力類型測試分類的最終目的，是指導(dǎo)學(xué)生在具體的職業(yè)規(guī)劃中進行職業(yè)定位。而這一過程的具體依據(jù)是學(xué)生在這些指標體系中所集中體現(xiàn)出的個體職業(yè)規(guī)劃的長處與短板。因為這些長處與短板的形成是基于具體性格特質(zhì)測試與動力類型歸類的，反映的是個體情況，這是提供職業(yè)規(guī)劃個別化指導(dǎo)的重要基礎(chǔ)。長處與短板最終又成為職業(yè)選擇與規(guī)避的重要參照，顯得直接明了，為學(xué)生在自身的職業(yè)定位與今后的職業(yè)角色扮演中進行積極的知識技能儲備指引了方向。這正是職業(yè)規(guī)劃工作的重要意義與價值所在。
［
參考文獻］
［1］鐘谷蘭，楊開.大學(xué)生職業(yè)生涯發(fā)展與規(guī)劃［M］.上海：華東師范大學(xué)出版社，2008.
［2］司馬云杰.文化社會學(xué)［M］.太原：山西教育出版社，2007.
［3］初宇平，姜鶴，孫云龍主編.大學(xué)生職業(yè)生涯規(guī)劃理論與實務(wù)［M］.北京：北京師范大學(xué)出版社，2012.
一本章的主要內(nèi)容和特點
本章包括《組成生物體的化學(xué)元素》和《組成生物體的化合物》兩節(jié)教材。第一節(jié)教材需用1課時教學(xué)，第二節(jié)教材需用2課時教學(xué)。此外，有1個學(xué)生實驗。
第一節(jié)《組成生物體的化學(xué)元素》。首先，在節(jié)的引言中，明確指出自然界中的生物和非生物都是由化學(xué)元素組成的。接著，講述組成生物體的化學(xué)元素、組成生物體化學(xué)元素的重要作用、生物界與非生物界的統(tǒng)一性和差異性三方面內(nèi)容。
關(guān)于組成生物體的化學(xué)元素的內(nèi)容，一開始就指出組成生物體的化學(xué)元素主要有20多種，緊接著以玉米和人體為例，將含量較多的化學(xué)元素以及這些元素的含量列成表。通過對表中內(nèi)容的分析，概括出兩點：一是組成玉米和人體的基本元素是C、O、H、N；二是組成生物體的各種化學(xué)元素，在不同的生物體內(nèi)，含量相差很大，由此進一步提出了大量元素和微量元素的概念和種類。
關(guān)于組成生物體化學(xué)元素的重要作用的內(nèi)容，首先強調(diào)指出，在大量元素中，C是最基本的元素，C、H、O、N、P、S這6種元素是組成細胞的主要元素。接著，說明組成生物體的化學(xué)元素進一步組成多種多樣的化合物，這些化合物是生物體結(jié)構(gòu)和生命活動的物質(zhì)基礎(chǔ)。
關(guān)于生物界與非生物界的統(tǒng)一性和差異性的內(nèi)容，主要是從組成生物體和無機自然界的化學(xué)元素的相同和不同，提出了辯證唯物主義觀點：一點是從組成生物體的化學(xué)元素在無機自然界中都可以找到的事實，來說明生物界和非生物界具有統(tǒng)一性；另一點是從組成生物體的化學(xué)元素在生物體內(nèi)的含量與在無機自然界中的含量相比，兩者相差很大的事實，來說明生物界和非生物界還具有差異性。
第二節(jié)《組成生物體的化合物》。首先，明確提出構(gòu)成細胞的化合物，主要包括無機化合物的水和無機鹽，有機化合物的糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸。然后，依次講述構(gòu)成細胞的這6種化合物。，全國公務(wù)員共同天地
關(guān)于無機化合物的水，著重說明它在細胞中含量最多；水在不同的生物體中和不同的組織、器官中含量不同；水在細胞中以結(jié)合水和自由水兩種形式存在；水在細胞內(nèi)的重要作用。最后強調(diào)指出，生物體的一切生命活動，絕對不能離開水。
關(guān)于無機鹽，強調(diào)指出它在細胞中雖然含量很少，且大多數(shù)無機鹽以離子狀態(tài)存在于細胞中，但是具有多方面的重要作用：無機鹽既是細胞內(nèi)復(fù)雜化合物的重要組成成分，又對維持生物體的生命活動有重要作用。
關(guān)于糖類，主要說明它由C、H、O3種化學(xué)元素組成，它是構(gòu)成生物體的重要成分，也是細胞的主要能源物質(zhì)；糖類大致分為單糖、二糖和多糖等幾類(其中的葡萄糖、核糖、脫氧核糖、淀粉、糖元等是重要種類)，以及它們在生物體內(nèi)的分布和重要作用。
關(guān)于脂質(zhì)，主要說明它由C、H、O3種元素組成，一般包括脂肪、類，全國公務(wù)員共同天地脂和固醇等；這幾類物質(zhì)在生物體內(nèi)的分布和重要作用，并強調(diào)指出，磷脂是構(gòu)成細胞膜和多種細胞器的膜結(jié)構(gòu)的重要組成成分。
關(guān)于蛋白質(zhì)，是本節(jié)的重點內(nèi)容，教材中比較詳細地講述了有關(guān)內(nèi)容。首先，強調(diào)蛋白質(zhì)在細胞中只比水的含量少，大致占細胞干重的50%以上，它是細胞中各種結(jié)構(gòu)的重要化學(xué)成分。接著，說明蛋白質(zhì)主要由C、H、O、N4種化學(xué)元素組成；它是一種高分子化合物，相對分子質(zhì)量很大；基本組成單位是氨基酸；蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)是由許多氨基酸分子互相連接而成；蛋白質(zhì)分子的多樣性，決定了蛋白質(zhì)在生物體內(nèi)有多種重要的功能。
關(guān)于核酸，首先明確指出核酸是遺傳信息的載體，它對生物體的遺傳、變異和蛋白質(zhì)的生物合成有極重要的作用。然后，說明核酸由C、H、O、N、P等化學(xué)元素組成，也是一種高分子化合物；核酸的基本組成單位是核苷酸；核酸可以分為脫氧核糖核酸和核糖核酸兩大類。
本節(jié)教材的最后一段指出，任何一種化合物都不能單獨地完成某一種生命活動，只有按照一定的方式有機地組織起來，才能表現(xiàn)出細胞和生物體的生命現(xiàn)象。這里也體現(xiàn)了辯證唯物主義的觀點。
在本章中，為了配合學(xué)習(xí)有機化合物的內(nèi)容，安排了學(xué)生實驗《生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定》，主要是根據(jù)某些化學(xué)試劑，能夠分別使生物組織中上述三種有機化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)，來鑒定生物組織中有還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的存在。
二本章與其他章的聯(lián)系
1.本章是緒論后的開篇章，所講內(nèi)容是最基礎(chǔ)的知識，因此與后面的各章都有密切關(guān)系，是學(xué)習(xí)好其他各章的基礎(chǔ)，教學(xué)中要注意前后知識的聯(lián)系。
2.組成生物體的化學(xué)元素和化合物的知識，是講述第二章《生命活動的基本單位──細胞》的重要基礎(chǔ)。例如，講述細胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，會用到磷脂、蛋白質(zhì)等知識。
3.第三章《生物的新陳代謝》，與本章聯(lián)系十分緊密。例如，講述植物的物質(zhì)代謝時，要用到酶、水、大量元素、微量元素等知識；在講到人和動物的物質(zhì)代謝時，要用到糖類、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的知識。
4.第四章《生命活動的調(diào)節(jié)》在講到激素的調(diào)節(jié)作用時，要用到蛋白質(zhì)等知識。
5.第六章《遺傳和變異》在講到生物體的遺傳性和變異性時，有關(guān)蛋白質(zhì)和核酸的知識，是重要的基礎(chǔ)知識。
一、教學(xué)目標分析
（一）知識與技能：
（1）了解人體的元素組成。
（2）了解一些元素對人體健康的重要作用。
（3）了解人體中元素的存在形式，知道常量元素和微量元素。
（二）過程與方法：
（1）通過與同學(xué)討論、查閱資料，了解鈣、鐵、鋅、碘等營養(yǎng)元素的食物來源。
（2）調(diào)查市場上有關(guān)補鈣、補鋅等保健藥劑，查看它們的標簽或說明書，了解它們的主要成分。
（三）情感態(tài)度與價值觀：
（1）通過查閱相關(guān)資料，豐富課本知識。
（2）通過本課題學(xué)習(xí)，更加注意平常的飲食營養(yǎng)搭配，改掉偏食、挑食、不吃蔬菜等不良習(xí)慣。
（3）學(xué)會用一分為二的觀點辯證地看待化學(xué)元素對人體健康的影響.
二、教學(xué)重點：
人體的主要元素組成、分類及作用，一些元素對人體健康的影響。
三、教學(xué)難點：
微量元素對人體的作用及適宜攝入量。
四、教學(xué)準備：
1、學(xué)生以“你知道人體內(nèi)含有哪些元素”為題，在課前進行資料查找。
2、教師在充分估計學(xué)生查找資料的情況的前提下，制作好課件。
五、教學(xué)過程：
課時安排：1個課時
新課導(dǎo)入：
師：俗話說：“吃什么補什么”生活中有些人用骨頭燉湯，多喝骨頭湯，能補充什么營養(yǎng)元素呢？（展示骨頭）
生：
師：那么人體由哪些元素組成，這些元素對人體健康有什么重要？怎樣補充這些元素？這節(jié)課我們就來一起學(xué)習(xí)課題2
化學(xué)元素與人體健康
（板書
課題2
化學(xué)元素與人體健康）
講授新課：
同樣是為了補充鈣元素，喝純牛奶和高鈣奶，哪一種補充鈣元素的效果更好呢？
生：（回答）
師：鐵強化的生抽比普通的生抽，強化補充了什么元素？
生：（回答）
師：用加碘鹽呢，強化補充了什么元素？
生：（回答）
師：請同學(xué)們來討論一下，這幾種營養(yǎng)強化食品有哪些共同之處?還能列出類似的食品嗎？
生：
師：人類為什么要生產(chǎn)營養(yǎng)強化品？
師：前面我們學(xué)習(xí)過生物細胞中的元素，讓我們通過微課一起認識人體中存在的元素。
（板書：一、人體中含有的元素）
師：同學(xué)們能說說人體中有多少種元素嗎？《板書：（50）》
生：
師：下面請同學(xué)來回答
生：回答2、3、4、
（板書：常量元素
＞0.01%
微量元素
＜0.01%）
同學(xué)們讀課本P97頁圖12-10人體中存在的常量元素、微量元素有哪些
（板書：O、C、H、N
...
Fe、Co、Cu、Zn...）
師：這些元素在人體中的生理功能是什么？讓我們繼續(xù)通過微課來了解某些元素對人體健康的影響
（板書：二、某些元素對人體健康的影響）
師：人體中含量最高的金屬元素是什么？
生：
師：誰來說說鈣元素在人體中以什么形式存在？
生：
師：它的生理作用是什么呢？
生：
師：缺乏鈣元素，對人體健康有哪些危害？
生：
師：鈉元素和鉀元素對人體健康也有著重要作用，它們在人體中存在形式分別是什么呢？
生：
師：它們的生理作用呢？
生：
師：同學(xué)們來思考一下運動員激烈運動，大量出汗之后，常會飲用一些含無機鹽的運動飲料。為什么？
生：
師：除常量元素外，不少微量元素也是人體必需的，下面請幾位同學(xué)抽簽回答幾種必需元素對人體的作用及攝入量過低對人體健康的影響。
生：
師：同學(xué)們來了解一下幾種元素的主要食物來源，為接著的小游戲做準備（板書：微量元素）
師：先請一位同學(xué)上來做模特，出示某元素，其他同學(xué)上講臺選出該元素的缺乏癥，及其主要的食物來源，看看誰最快，選出的有多又正確，參與的同學(xué)都有獎勵哈！
師：鐵、鋅、碘等這些人體必需的微量元素，還有一些微量元素是有害元素
比如：攝入汞、鉛、鎘等攝入過多會中毒、
所以我們要防止有害元素對人體的侵害。
師：“缺什么補什么如何補”，我們來看一段視頻了解一下
關(guān)鍵詞：生物 學(xué)習(xí) 觀點
2010年秋季，甘肅省全面實施高中新課程。新課程標準下的高中生物與舊課程相比，更強調(diào)了探究能力的培養(yǎng)，要求全面提高學(xué)生的生物科學(xué)素養(yǎng)。主要的思路是沿著科學(xué)家們對生物學(xué)的認識過程來呈現(xiàn)知識內(nèi)容，使學(xué)生體會探究的樂趣。樹立正確的生物學(xué)觀點是學(xué)習(xí)生物學(xué)、提高學(xué)生科學(xué)素質(zhì)的重要目標之一，是生物新課程改革的一個基本要求；正確的生物學(xué)觀點又是學(xué)習(xí)、研究生物學(xué)的有力武器。
一、生命的物質(zhì)性觀點
生物具有共同的物質(zhì)基礎(chǔ)，即組成生物體的化學(xué)元素和化合物基本相同。組成生物體的化學(xué)元素有二十多種，它們在生物體內(nèi)的含量不同。含量占生物體總質(zhì)量的萬分之一以上的元素稱大量元素，如C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg等。生物生活所必需，但是需要量卻很少的一些元素，稱微量元素，如Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等。這些化學(xué)元素對生物體都有重要作用。組成生物體的二十多種化學(xué)元素，在無機自然界都可以找到，沒有一種化學(xué)元素是生物所特有的。這個事實說明，生物界和非生物界具有統(tǒng)一性。生命的物質(zhì)性觀點能幫助我們理解生物界與無機自然界的統(tǒng)一性以及生物的進化歷程。
二、生物結(jié)構(gòu)與功能相統(tǒng)一的觀點
生物體的結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)。結(jié)構(gòu)與功能相統(tǒng)一的觀點包括兩層意思：一是有一定的結(jié)構(gòu)就必然有與之相對應(yīng)功能的存在；二是任何功能都需要一定的結(jié)構(gòu)來完成。例如C3植物和C4植物的葉片結(jié)構(gòu)與其功能相適應(yīng)：C3植物的維管束鞘細胞不含葉綠體，葉肉細胞含有正常葉綠體；C4植物的維管束鞘細胞含沒有基粒的葉綠體，葉肉細胞則含有正常的葉綠體。所以C3植物的葉肉細胞中進行光合作用的光反應(yīng)以及暗反應(yīng)的C3途徑，C4植物的葉肉細胞既進行光反應(yīng)又進行暗反應(yīng)的C4途徑，而維管束鞘細胞只進行暗反應(yīng)的C3途徑，因此，C3植物光合作用產(chǎn)物淀粉存在于葉肉細胞，而C4植物光合作用產(chǎn)物淀粉則存在于維管束鞘細胞中。
三、生物的整體性觀點
系統(tǒng)論有一個重要的思想，就是整體大于各部分之和，這一思想也完全適合生物領(lǐng)域。不論是細胞水平、組織水平、器官水平還是個體水平，甚至包括種群水平和群落水平，都體現(xiàn)出整體性的特點。例如生物體的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)――細胞，其亞顯微結(jié)構(gòu)中的細胞膜、核膜以及線粒體、葉綠體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體、高爾基體、中心體、液泡、溶酶體等細胞器都有其特有的結(jié)構(gòu)和功能，但是只有在它們組成一個整體――細胞的時候才能完成新陳代謝等生命活動，這就是細胞結(jié)構(gòu)的完整性。若從結(jié)構(gòu)上看，生物膜不僅具有直接的聯(lián)系，而且具有間接的聯(lián)系，即生物膜之間可以相互轉(zhuǎn)化；從功能上看，細胞的各部分結(jié)構(gòu)既有明確的分工，又有緊密的聯(lián)系，協(xié)調(diào)一致地共同完成各項生命活動。從調(diào)控上看，細胞核是遺傳物質(zhì)儲存、復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的場所，是細胞遺傳和代謝的控制中心，在遺傳物質(zhì)的調(diào)控下細胞成為一個統(tǒng)一的整體。從與外界環(huán)境的關(guān)系上看，細胞的整體性還表現(xiàn)在每一個細胞都要與相鄰細胞進行物質(zhì)交換和能量交換，而與外界直接接觸的細胞都要與外界環(huán)境進行物質(zhì)交換和能量轉(zhuǎn)換。
四、生命活動對立統(tǒng)一的觀點
生物的諸多生命活動之間都有一定的關(guān)系，有的甚至具有對立統(tǒng)一的關(guān)系。例如，植物的光合作用和呼吸作用、同化作用與異化作用就是對立統(tǒng)一的生命活動。光合作用的實質(zhì)是合成有機物，儲存能量；呼吸作用的實質(zhì)是分解有機物，釋放能量。很明顯，兩者之間是相互對立的。呼吸作用所分解的有機物正是光合作用的產(chǎn)物，可以說，如果沒有光合作用，呼吸作用就無法進行；另一方面，光合作用過程中，原料和產(chǎn)物的運輸所需要的能量，也正是呼吸作用釋放出來的，如果沒有呼吸作用，光合作用也無法進行。因此說，呼吸作用和光合作用又是相互聯(lián)系、相互依存的。只有光合作用和呼吸作用的共同存在，才能使植物體的生命活動正常進行。
五、生物進化的觀點
辯證唯物主義認為，一切事物都處在不斷的運動變化之中，任何事物都有一個產(chǎn)生、發(fā)展和滅亡的過程。生物界也不例外，也有一個產(chǎn)生和發(fā)展的過程。所謂產(chǎn)生就是生命的起源，所謂發(fā)展就是生物的進化。生命的起源經(jīng)歷了從無機小分子物質(zhì)生成有機小分子物質(zhì)，再形成有機高分子物質(zhì)，進而組成多分子體系，最后演變?yōu)樵忌淖兓^程；生物的進化遵循從單細胞到多細胞，結(jié)構(gòu)上從簡單到復(fù)雜，生活環(huán)境上從水生到陸生，進化地位上從低等到高等的規(guī)律。生殖隔離是新物種形成的標志。
【摘要】
目的探討川芎嗪對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導(dǎo)血管平滑肌細胞(VSMC)中血小板源生長因子（PDGF）表達的影響。方法培養(yǎng)大鼠主動脈VSMC，以 10-7mol/L AngⅡ刺激作為AngⅡ組 ，AngⅡ刺激前分別應(yīng)用不同濃度川芎嗪預(yù)處理做為高、中、低劑量組，以正常的VSMC為對照組，測定VSMC增殖活度，免疫細胞化學(xué)法檢測培養(yǎng)24h時VSMC PDGF-B的表達。結(jié)果AngⅡ組VSMC增殖活度與 PDGF-B表達顯著高于對照組(P
【關(guān)鍵詞】 川芎嗪 血管緊張素Ⅱ 血管平滑肌細胞 血小板源生長因子
經(jīng)皮冠狀動脈腔內(nèi)成形術(shù)（percutaneous transluminal coronary angioplasty，PTCA）后再狹窄一直是冠心病治療領(lǐng)域的一大難題，血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)異常增殖是PTCA術(shù)后再狹窄的一個重要病理改變［1］。有文獻報道，血管緊張素II(angiotensin II，AngⅡ)、血小板源生長因子（platelet-derived growth factor， PDGF）在VSMC增殖中作用明顯［2，3］。本研究以體外原代培養(yǎng)的大鼠主動脈平滑肌細胞為模型，觀察AngⅡ與PDGF-B表達的關(guān)系以及川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)對其影響，探討TMP對VSMC增殖的作用機制。
1 材料與方法
1.1 動物及試劑
體重120～150 g的健康雄性SD大鼠 （河南省實驗動物中心）。鹽酸川芎嗪注射液（無錫市第七制藥公司），DMEM培養(yǎng)基干粉（Sigma）、細胞培養(yǎng)器材、胎牛血清、胰蛋白酶購自華美生物工程公司；AngⅡ（Merck公司），PDGF-B抗體（博士德），sm-actin免疫試劑盒（Santa Cruz），其它試劑為分析純產(chǎn)品。
1.2 細胞培養(yǎng)與鑒定
將大鼠斷頭處死，無菌條件下迅速打開胸腔，取出胸主動脈，按組織貼塊法在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)以含20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)。光鏡下以及倒置相差顯微鏡下觀察細胞呈梭形，生長至融合狀態(tài)時呈現(xiàn)特有的峰與谷特點，同時經(jīng)sm-actin免疫細胞化學(xué)染色鑒定，細胞純度達95%以上。選擇4-6代VSMC進行實驗。
1.3 實驗分組
①對照組(control)：不加特殊試劑，僅給予無血清DMEM培養(yǎng)；②AngII組：AngII 10-7mol/L培養(yǎng)；③TMP低劑量組：20 mg/L TMP預(yù)孵育30 min后，加AngⅡ培養(yǎng)；④TMP中劑量組：200 mg/LTMP預(yù)孵育30 min，加AngⅡ培養(yǎng)；⑤TMP高劑量組：2 000 mg/L TMP預(yù)孵育30 min，加AngⅡ培養(yǎng)。
1.4 檢測細胞增殖活度
采用MTT法。按上述方法接種于96孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)48 h后終止，換無血清DMEM培養(yǎng)24 h，分組（同前）繼續(xù)培養(yǎng)24 h，每孔加入MTT溶液20 μl，吸去培養(yǎng)上清液，每孔加入150 μl二甲基亞砜振蕩；選擇490 nm波長，在酶標儀上測定各孔吸光度值（A值）。
1.5 免疫細胞化學(xué)法檢測
PDGF-B的表達0.25%胰蛋白酶消化制備細胞懸液，調(diào)整細胞密度為5×104/L，接種于內(nèi)置有蓋玻片的6孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)48 h，無血清DMEM培養(yǎng)24 h，分組（同前）繼續(xù)培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)細胞爬片用PBS沖洗3次，4%多聚甲醛固定15 min，0.3%過氧化氫中孵育10 min；滴加復(fù)合消化液后滴加封閉血清，37℃，30 min，滴加PDGF-B一抗（1∶200），4℃過夜，滴加二抗工作液，37℃孵育30 min；滴加SABC，37℃孵育30 min。DAB 顯色，中性樹膠封片。
1.6 計算機圖像分析
每一張涂片400倍顯微鏡下隨機選擇5個視野，計算其平均灰度值，數(shù)值越大表示抗原表達量越小。
1.7 統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)用±s表示
計算機統(tǒng)計軟件分析SPSS11.0，采用One-way ANOVA分析，兩兩比較LSD檢驗。
轉(zhuǎn)貼于
2 結(jié) 果
2.1 TMP對AngⅡ刺激的VSMC增殖活度的影響
AngⅡ組細胞增殖活度明顯高于對照組（P
2.2 TMP對AngⅡ誘導(dǎo)的VSMC PDGF-B表達的影響
顯微鏡下觀察，PDGF-B陽性表達為VSMC胞漿與胞核呈棕黃色反應(yīng)，主要為胞漿表達。與對照組相比，AngⅡ刺激24h后，VSMC表達PDGF-B顯著增強(P
3 討論
TMP是從中藥川芎中分離提純的有效成分，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為四甲基吡嗪。廣泛用于高血壓病、冠心病等的防治。研究表明TMP具有擴張冠狀動脈、抗凝、抗血小板聚集、抗心肌缺血/再灌注損傷降低血壓、降低肺動脈高壓以及抑制血管平滑肌細胞增殖等多種心血管藥理作用［4］。TMP可能通過抑制VSMC增殖發(fā)揮抗血管再狹窄作用，但其具體分子機制尚不清楚。
我們先前的研究表明［5］，血管損傷后再狹窄時血漿AngⅡ水平顯著升高，血管壁PDGF-B表達顯著增強。PDGF是由血小板、平滑肌細胞等分泌的一種糖蛋白，其家族目前至少有4個亞基，即PDGF-A，PDGF-B，PDGF-C，PDGF-D。其中由PDGF-A，PDGF-B形成的同源二聚體具有強烈的促進有絲分裂及細胞趨化作用，在體外可刺激心肌細胞、血管平滑肌細胞、成纖維細胞等多種類型細胞的肥大或增殖。PDGF與其膜表面受體結(jié)合，激活受體的內(nèi)源性酪氨酸激酶活性，通過磷酸化胞漿中的信號分子，最終將信息傳遞到核內(nèi)，導(dǎo)致VSMC增殖［6］。
本實驗結(jié)果顯示，AngⅡ誘導(dǎo)的VSMC PDGF-B表達水平顯著高于對照組，同時VSMC增殖活度增強。提示AngⅡ可以通過上調(diào)PDGF-B表達、增強PDGF-B介導(dǎo)的細胞信號通路進一步促進血管平滑肌細胞增殖；不同劑量的TMP作用后，AngⅡ誘導(dǎo)的VSMC PDGF-B表達水平顯著下調(diào)，VSMC增殖活度顯著減弱。說明TMP能抑制AngⅡ誘導(dǎo)的血管平滑肌細胞增殖，該效應(yīng)與抑制PDGF-B表達有關(guān)；在相同培養(yǎng)時間內(nèi)，隨著TMP濃度增加，細胞增殖活度及PDGF-B表達水平逐漸降低，說明TMP的抑制作用具有量效關(guān)系。
綜上所述，川芎嗪對AngⅡ誘導(dǎo)的VSMC增殖有顯著抑制作用，其作用機制與抑制PDGF介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。
參考文獻
［1］Yang W， Ge J， Liu H，et al. Arsenic trioxide eluting stent reduces neointima formation in a rabbit iliac artery injury model［J］.Cardiovasc Res， 2006 ，72(3)：483.
［2］羅德生，鄭紅花，李映紅，等.川芎嗪抗血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的離體培養(yǎng)血管平滑肌細胞增殖的實驗研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2006，17（3）：321.
［3］Kim TJ， Yun YP. Antiproliferative activity of NQ304， a synthetic 1，4-naphthoquinone， is mediated via the pressions of the PI3K/Akt and ERK1/2 signaling pathways in PDGF-BB-stimulated vascular smooth muscle cells［J］. Vascul pharmacol， 2007，46(1)：43.
［4］梁愛群.川芎嗪的藥理及機理研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2005，16（6）：532.
紅磷的相對原子質(zhì)量取31。
磷：第15號化學(xué)元素，符號P。處于元素周期表的第三周期、第ⅤA族。磷存在于人體所有細胞中，是維持骨骼和牙齒的必要物質(zhì)，幾乎參與所有生理上的化學(xué)反應(yīng)。磷還是使心臟有規(guī)律地跳動、維持腎臟正常機能和傳達神經(jīng)刺激的重要物質(zhì)。
相對原子質(zhì)量：元素的相對原子質(zhì)量是其各種同位素相對原子質(zhì)量的加權(quán)平均值。元素周期表中最下面的數(shù)字為相對原子質(zhì)量。
（來源：文章屋網(wǎng) ）
硒是一種化學(xué)元素，化學(xué)符號是Se，一種非金屬?？梢杂米鞴饷舨牧?、電解錳行業(yè)催化劑、動物體必需的營養(yǎng)元素和植物有益的營養(yǎng)元素等。
硒在自然界的存在方式分為兩種：無機硒和植物活性硒。無機硒一般指亞硒酸鈉和硒酸鈉，從金屬礦藏的副產(chǎn)品中獲得；植物活性硒是硒通過生物轉(zhuǎn)化與氨基酸結(jié)合而成，一般以硒蛋氨酸的形式存在。
硒作用與應(yīng)用是在體內(nèi)硒和維生素E協(xié)同，能夠保護細胞膜，防止不飽和脂肪酸的氧化，微量硒具有防癌作用及保護肝臟的作用。
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